L’essentiel
- Vérification de la température du bloc à plusieurs consignes, avec exactitude et homogénéité entre puits.
- Maintenance des appareils de PCR en temps réel avec étalonnages du bruit de fond, d’uniformité, des zones d’intérêt (ROI) et des colorants, selon l’instrument.
- Nettoyage des blocs, couvercles chauffants, ventilateurs et filtres à air.
- Un rapport écrit avec les valeurs mesurées pour votre système qualité.
Pourquoi vérifier un thermocycleur ?
Les températures du bloc dérivent avec le vieillissement des éléments Peltier. Un bloc décalé d’un degré à l’hybridation peut réduire le rendement ou produire des produits non spécifiques, et un bloc inhomogène fait varier les réplicats. Une vérification régulière prouve que l’instrument respecte encore sa spécification, et les laboratoires accrédités en ont besoin pour leurs audits ISO 15189 ou ISO/IEC 17025.
Vérification des thermocycleurs
- Exactitude de la température aux consignes utilisées, généralement dénaturation, hybridation et élongation.
- Homogénéité sur le bloc, mesurée simultanément à plusieurs positions de puits.
- Comportement en chauffe et en refroidissement, y compris dépassement et stabilité des paliers lorsque l’instrument le permet.
- Fonctionnement du couvercle chauffant et propreté du bloc.
- Conformité ou non-conformité à la spécification du fabricant, avec toutes les valeurs mesurées dans le rapport.
Maintenance des appareils de PCR en temps réel
- Inspection et nettoyage du bloc et du chemin optique.
- Étalonnages du bruit de fond et d’uniformité.
- Étalonnage des zones d’intérêt (ROI) ou des positions de puits.
- Étalonnages des colorants (spectres purs) pour les colorants de vos essais.
- Une série de vérification, par exemple avec une plaque RNase P sur les systèmes compatibles.
À quelle fréquence ?
La plupart des laboratoires vérifient leurs thermocycleurs et entretiennent leurs appareils de PCR en temps réel une fois par an, plus souvent pour les instruments utilisés dans des méthodes accréditées ou de diagnostic. Suivez votre système qualité et le guide de maintenance du fabricant ; nous planifions les visites suivantes pour que chaque instrument reste dans son intervalle d’étalonnage.
Questions fréquentes
Quels thermocycleurs et appareils de qPCR prenez-vous en charge ?
Les thermocycleurs Applied Biosystems comme les Veriti, ProFlex, SimpliAmp et GeneAmp 9700, les systèmes de PCR en temps réel comme les 7500, StepOnePlus et QuantStudio, et d’autres marques sur demande. Voir thermocycleurs pour les modèles que nous rencontrons le plus souvent.
Le rapport peut-il servir pour les audits ISO ?
Le rapport indique l’instrument, la méthode de mesure et chaque valeur mesurée : vous pouvez le classer comme enregistrement d’équipement. Si votre auditeur exige un certificat d’étalonnage accrédité, prévenez-nous avant l’intervention.
Que faut-il préparer avant l’intervention ?
Libérez l’instrument pour la durée prévue, préparez les derniers enregistrements d’étalonnage et les éventuels journaux d’erreurs, et assurez-vous que l’ordinateur et le logiciel de l’instrument sont accessibles.
Que comprend la maintenance d’un appareil de PCR en temps réel ?
Le nettoyage du bloc et du trajet optique, les étalonnages du bruit de fond et de l’uniformité, l’étalonnage de la région d’intérêt, les étalonnages des fluorophores que vous utilisez et un essai de vérification, selon ce que l’instrument exige.
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